【臨床醫(yī)師和流行病學(xué)家希望能在出生前幾個(gè)月里就確定嬰兒是否感染了寨卡病毒，為此美國(guó)**控制與預(yù)防中心CDC的科學(xué)家們進(jìn)行了一種稱為蝕斑減少中和試驗(yàn)(Plaque Reduction Neutralization Test) 的檢測(cè)，這種方法是檢測(cè)血清中和抗體的一種敏感性較高的方法，能檢測(cè)之前的感染。】
2014年以來美洲多個(gè)國(guó)家相繼發(fā)生寨卡病毒（Zika）感染病例，世界衛(wèi)生組織近日警告，寨卡病毒正呈現(xiàn)“暴發(fā)式傳播”，預(yù)計(jì)美洲地區(qū)將有至多400萬人感染這種病毒。截至目前，中國(guó)大陸尚未發(fā)現(xiàn)病例，但**預(yù)防控制中心指出我國(guó)仍存在病例輸入風(fēng)險(xiǎn)。
目前關(guān)于這種病毒傳播的疑問不少，比如懷孕期間感染與造成嬰兒小頭畸形之間的關(guān)聯(lián)，但由于目前診斷方法的局限性，還很難給出一個(gè)答案來。一組研究人員正在攻關(guān)，希望能以*快的速度研發(fā)出**試劑，檢測(cè)是否感染Zika病毒。
來自德州大學(xué)加爾維斯頓醫(yī)學(xué)分校的Nikos Vasilakis表示，“我們正盡全力盡快給臨床醫(yī)師們一些答案。”
目前，檢測(cè)寨卡病毒的標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法是對(duì)樣本進(jìn)行PCR，分析樣本中的病毒RNA探針是否存在，雖然這種方法能很好的檢測(cè)到病毒，但是病原體的RNA很快就會(huì)被降解掉。“在患者把樣品送入臨床時(shí)，病毒也許已經(jīng)消失，或者只能抓住它的尾巴了，這超過了檢測(cè)時(shí)間限制，”Vasilakis說。
臨床醫(yī)師和流行病學(xué)家希望能在出生前幾個(gè)月里就確定嬰兒是否感染了寨卡病毒，為此美國(guó)**控制與預(yù)防中心CDC的科學(xué)家們進(jìn)行了一種稱為蝕斑減少中和試驗(yàn)(Plaque Reduction Neutralization Test) 的檢測(cè)，這種方法是檢測(cè)血清中和抗體的一種敏感性較高的方法，能檢測(cè)之前的感染。
從原理上說，這一檢測(cè)方法以使蝕斑數(shù)減少50％的血清稀釋度作為其中的效價(jià)。試驗(yàn)使用定量的病毒(100PFU)與不同稀釋度的等量血清混合后感作, 接種預(yù)先準(zhǔn)備好的單層細(xì)胞，再覆蓋上營(yíng)養(yǎng)瓊脂置37度二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)，數(shù)天后分別統(tǒng)計(jì)蝕斑數(shù)，用Karber法計(jì)算該血清的蝕斑中和效價(jià)。
患者的血清中混有病毒，幾天時(shí)間里研究人員觀察病毒是否會(huì)感染培養(yǎng)基，如果沒有，那么病毒就已經(jīng)被血清中的抗體中和了，這表明患者曾經(jīng)接觸過寨卡病毒。
CDC甲類病毒實(shí)驗(yàn)室主任Ann Powers表示，使用這種方法的問題在于“你必須有活體病毒，和合適**的環(huán)境，”這意味著只有少數(shù)幾個(gè)實(shí)驗(yàn)室能進(jìn)行這種試驗(yàn)。
其它更加方便的血清學(xué)測(cè)試也能檢測(cè)特定病原體中的抗體，但是對(duì)于寨卡病毒來說，很難判斷患者攜帶的黃病毒是登革熱病毒，寨卡病毒還是其它病毒。“而且寨卡病毒出去的區(qū)域也正是登革熱出現(xiàn)的地區(qū)，”來自華盛頓大學(xué)圣路易斯分校的**學(xué)家Mike Diamond說。
Vasilakis 正在嘗試ELISA方法，也就是檢測(cè)體液中微量物質(zhì)的固相**測(cè)定的方法，這種方法利用抗原與抗體的特異反應(yīng)將待測(cè)物與酶連接，然后通過酶與底物產(chǎn)生顏色反應(yīng)，用于定量測(cè)定，可以在感染后幾個(gè)星期內(nèi)檢測(cè)到Zika病毒。雖然這也有可能會(huì)與其它感染發(fā)生一定程度的交叉反應(yīng)，但如果Zika病毒特異性抗體濃度高就能指示出近期發(fā)生的Zika病毒感染，Vasilakis說。
Vasilakis預(yù)計(jì)在未來幾周內(nèi)，Diamond研究組就會(huì)有結(jié)果，研發(fā)出一種針對(duì)Zika病毒的單克隆抗體檢測(cè)方法，這能與ELISA方法結(jié)合，檢測(cè)發(fā)生過的感染，“我們很早就開展了這項(xiàng)研究，這個(gè)月就能得到結(jié)果，”Diamond說，“初步結(jié)果表明我們的一些抗體能特異性識(shí)別Zika病毒。”
不過即使Diamond研究組的抗體能特異性檢測(cè)Zika病毒，他們也需要一些時(shí)間來建立診斷方法，“這可能還需要幾個(gè)月的時(shí)間。”
與此同時(shí)，一些生物公司也開始銷售Zika血清學(xué)檢測(cè)，比如MyBioSource 公司已經(jīng)有售一種針對(duì)Zika的IgM ELISA檢測(cè)，來自加拿大的Biocan 公司也在出售一種檢測(cè)IgM和IgG抗體（后者比前者在感染后提升水平更高）的扎手指檢測(cè)方法，能在5到10分鐘得到結(jié)果。
Diamond表示他們還未接觸任何商業(yè)產(chǎn)品，Biocan目前還未給出有效數(shù)據(jù)，但是其銷售部總經(jīng)理Bhavjit Jauhar表示他們已經(jīng)將實(shí)驗(yàn)室和現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)結(jié)果呈遞給巴西監(jiān)管當(dāng)局，“我們過去幾年間一直致力于Zika病毒的研究，因?yàn)槲覀冋J(rèn)為這種疫情會(huì)暴發(fā)。”
來源：儀器信息網(wǎng)
